在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的分析技术,用于分离和检测DNA片段。
在分子生物学和生物化学研究中,DNA的完整性和准确性对于实验的成功至关重要。Uracil-DNA Glycosylase (UDG),特别是来自大肠杆菌(E. coli)的UDG,是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶。UDG (5U/µl)以其高效的修复能力和精准的特异性,成为了许多实验中不可或缺的工具。 UDG的作用机制 UDG是一种DNA修复酶,能够特异性识别DNA中的尿嘧啶(U),并将其从DNA链中移除。这种酶的作用机制基于其对尿嘧啶的高亲和力。在DNA合成过程中,尿嘧啶可能会由于脱氨反应或其他化学修饰而意外掺入DNA链中。UDG通过识别这些尿嘧啶,并将其从DNA链中切除,从而防止错误碱基的积累。这种修复过程是维持DNA完整性和基因组稳定性的重要机制。 UDG在实验中的应用 PCR反应中的防污染:在PCR实验中,UDG常用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在PCR反应前加入UDG,可以将引物中的尿嘧啶降解,从而避免引物在反应前的非特异性结合。这种方法被称为“热启动PCR”,能够显著提高PCR反应的特异性和灵敏度。
更值得一提的是,该试剂中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)成分。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,确保实验结果的准确性和可靠性是至关重要的。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,为研究人员提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案,特别适用于需要高特异性和高灵敏度的实验场景。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)整合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于某些需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。 产品特点 低浓度ROX校正:该试剂盒中的ROX浓度经过优化,适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,同时避免高浓度ROX可能带来的背景荧光干扰。
上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。
DNA尿素加样缓冲液(2×)是一种专为变性核酸电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,能够有效解除DNA的二级结构,保持DNA的单链构型。产品特性成分:主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,不含溴酚蓝。使用特点:加样后易下沉,便于电泳操作。保存条件:-20℃避光保存,有效期为12个月。用途:仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他非科研用途。使用方法稀释:将2×DNA尿素加样缓冲液与待测核酸样品液按照1:1比例稀释。变性处理:将混合后的样品在95°C水浴中处理5分钟,然后在冰上冷却。电泳操作:将处理后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。DNA尿素加样缓冲液(2×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为变性核酸电泳实验中的理想选择。
二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。
Tris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的高浓度缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由900 mM Tris-磷酸、20 mM EDTA和DEPC处理水组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TPE工作液含有90 mM Tris-磷酸和2 mM EDTA,pH值约为8.0。 无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TPE缓冲液用DEPC处理水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TPE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察RNA条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。 避免RNase污染:使用时需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。
将 4S Green 10000× 储液稀释至 3× 染色液,将凝胶浸泡其中,室温振荡染色 30 分
等温扩增变色检测试剂盒是一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的核酸检测工具,能够在恒定温度下快速扩增目标DNA,并通过颜色变化直观地判断检测结果。这种技术无需复杂的温度循环设备,操作简便,适合快速检测病原体和微生物污染。 产品特性 高灵敏度:灵敏度比传统PCR方法高2-5个数量级,检测下限可达20-200 copies/μL。 快速检测:仅需1小时即可完成反应,适合快速诊断。 可视化结果:无需电泳,通过颜色变化(如紫罗兰或蓝紫色变为天蓝色或深天蓝色)即可判断结果。 防污染设计:采用dU掺入和热敏型UDG酶技术,有效防止扩增产物污染。 应用场景 该试剂盒广泛应用于检测生物样品中的病原体、微生物污染等。例如,碧云天的BeyoColor™等温扩增变色检测试剂盒可用于检测特定病原体的感染。此外,一些试剂盒还专门用于检测支原体污染,如BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒。 使用方法 配制反应体系:将LAMP Master Mix、引物、模板DNA、Bst DNA Polymerase等组分混合。 反应条件:在61-65℃下孵育30-60分钟。
RcView 吖啶橙核酸染料是一种细胞可渗透的荧光染料,能够与核酸结合并发出强烈的荧光信号。
甲酰胺加样缓冲液(2×)是一种专为RNA电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成,能够为RNA电泳提供稳定的环境和清晰的指示。产品特性成分:主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成。指示剂:以溴酚蓝为指示剂,稀释至1×后比重仍然较大,加样后易下沉,且颜色清晰可见。保存条件:2-8℃避光保存,有效期为1年。使用方法稀释:将2×甲酰胺加样缓冲液与RNA样品等比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项避免RNase污染:实验过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。
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