样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。
磁珠法动物RNA提取试剂盒是一种专为动物组织和细胞样本设计的高效RNA提取工具。它利用磁珠表面修饰的硅胶膜技术,通过磁力分离和洗涤步骤,快速提取高纯度的总RNA,包括mRNA、rRNA和小RNA。 工作原理 磁珠法动物RNA提取试剂盒的核心在于其磁珠表面修饰的硅胶膜。在特定的盐浓度下,RNA能够特异性地结合到硅胶膜上,而杂质则被去除。通过磁力架的作用,磁珠与溶液快速分离,经过洗涤去除残留杂质后,用低盐或水洗脱RNA。 优势 高纯度:提取的RNA纯度高,无蛋白和基因组DNA污染,适合多种下游实验。 快速高效:整个提取过程仅需30分钟,操作简便。 适用范围广:适用于多种动物组织和细胞样本,包括小鼠、大鼠、兔子等。 无需有毒试剂:无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂,操作更安全。 应用场景 提取的RNA可用于多种分子生物学实验,包括: 基因表达分析:如RT-qPCR、Northern blot。 高通量测序:如RNA-seq、miRNA-seq。 cDNA文库构建:用于基因克隆和功能研究。 体外翻译:用于研究基因表达和蛋白质合成。
将 4S Green 加入冷却至 50-60℃的琼脂糖溶液中,使其终浓度为 1×,轻轻混合后倒胶。
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。
3×甲酰胺凝胶上样缓冲液作为一种高效的辅助试剂,为核酸电泳提供了重要的支持。
在人体免疫系统中,β-防御素2(BD-2,Beta-Defensin 2)是一种重要的抗菌肽,广泛存在于人体的黏膜和上皮细胞中。BD-2在维持黏膜屏障功能和抵御病原体入侵方面发挥着关键作用,堪称人体免疫防御的“前线战士”。 BD-2的特性 BD-2是一种小分子阳离子肽,属于β-防御素家族。它由上皮细胞和某些免疫细胞分泌,具有广谱抗菌活性,能够有效抑制细菌、真菌和某些病毒的生长。BD-2的分子量约为4.5 kDa,其氨基酸序列具有六个半胱氨酸残基,形成三个分子内二硫键,这种结构赋予了BD-2高度的稳定性和抗菌活性。 BD-2的功能 BD-2在人体免疫防御中具有多种重要功能: 抗菌防御:BD-2能够直接杀灭多种病原微生物,通过破坏微生物的细胞膜,导致微生物死亡。BD-2对革兰氏阳性菌和阴性菌都具有抗菌活性,尤其对一些耐药菌株表现出较强的抑制作用。 免疫调节:BD-2不仅具有直接的抗菌活性,还能够调节免疫反应。它可以促进免疫细胞的趋化和活化,增强免疫系统对病原体的清除能力。此外,BD-2还能够诱导炎症因子的释放,进一步增强免疫反应。 黏膜屏障维护:BD-2在维持黏膜屏障功能方面发挥重要作用。
Taq PCR Master Mix (2×) Without Dye 是一种即用型的PCR预混液
T4 DNA聚合酶是一种来源于T4噬菌体的酶,具有独特的酶活性和广泛的应用价值。它能够催化DNA的5'→3'方向合成,同时具备3'→5'核酸外切酶活性,但不具有5'→3'核酸外切酶活性。这种酶在分子生物学实验中被广泛应用于多种场景。 工作原理 T4 DNA聚合酶的活性依赖于模板和引物的存在。它通过识别单链DNA模板上的引物,从5'端向3'端合成新的DNA链。此外,它还具有3'→5'外切酶活性,能够在没有dNTPs的情况下,按3'→5'方向降解双链DNA。这种外切酶活性在存在特定dNTP时会被抑制,例如当反应体系中仅存在dGTP时,酶会在遇到G碱基时停止降解。 应用 T4 DNA聚合酶在分子克隆中具有重要应用。例如,在In-Fusion克隆技术中,它利用3'→5'外切酶活性生成单链5'突出端,通过互补序列的退火实现DNA片段的无缝连接。此外,它还被用于DNA末端修饰,如将黏性末端转换为平末端,或在3'末端添加特定核苷酸。 在高通量测序(NGS)中,T4 DNA聚合酶用于文库构建,通过平滑DNA末端或添加特定序列,提高测序效率。它还被用于位点特异性突变、DNA末端标记等应用。
In-Fusion Cloning Kit 以其高效、简便灵活的特点,正在成为分子克隆实验中的首选。
在基因表达的复杂过程中,E.coli Poly(A)加尾酶(E.coli Poly(A) Polymerase I,简称PAP)扮演着一个独特而关键的角色。这种酶主要存在于大肠杆菌(E.coli)中,负责在RNA分子的3'末端添加多聚腺苷酸(Poly(A))尾巴,这一过程被称为Poly(A)加尾。 Poly(A)加尾是基因表达调控的重要环节之一。在大肠杆菌中,PAP通过在mRNA的3'末端添加Poly(A)尾巴,可以显著影响mRNA的稳定性、翻译效率以及降解速率。Poly(A)尾巴的添加能够保护mRNA免受核酸酶的降解,从而延长其在细胞内的半衰期,为蛋白质的合成提供更充足的时间。此外,Poly(A)尾巴还能增强mRNA与核糖体的结合能力,促进翻译过程的进行,提高蛋白质的合成效率。 E.coli Poly(A)加尾酶的活性受到多种因素的精细调控。例如,细胞内的腺苷酸水平、其他蛋白质因子以及细胞的生理状态等都会对其产生影响。这种调控机制使得PAP能够根据细胞的需求动态调整Poly(A)加尾的效率,从而实现对基因表达的精准调控。
总之,T4 DNA聚合酶凭借其多功能性和高效性,已成为分子生物学实验中不可或缺的工具酶。
在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。 热敏感型UDG的独特特性 热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。 热敏感型UDG的应用 热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。
上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!