预混液中加入UDG和dUTP,通过降解含尿嘧啶的DNA片段,防止PCR产物的交叉污染
大肠杆菌DNA连接酶(E. coli DNA Ligase)是一种在分子生物学中广泛应用的酶,最初于1967年在大肠杆菌中被发现。它能够催化DNA链的5'-磷酸和3'-羟基末端形成磷酸二酯键,从而连接相邻的DNA片段。 工作原理 大肠杆菌DNA连接酶通过NAD⁺作为辅酶,提供能量来完成连接反应。它主要作用于具有黏性末端的DNA片段,但连接平末端的效率较低。该酶在DNA复制、修复和重组过程中发挥重要作用,特别是在DNA聚合酶Ⅰ填满单链缺口后,封闭DNA双链上的缺口。 应用 大肠杆菌DNA连接酶广泛应用于分子克隆和基因工程中。它常用于连接由限制性内切酶切割产生的黏性末端DNA片段,是构建重组DNA分子的关键步骤。此外,它还被用于cDNA克隆等特定应用中。 优势与特点 专一性:大肠杆菌DNA连接酶主要作用于黏性末端,连接效率高。 依赖NAD⁺:与T4 DNA连接酶不同,它需要NAD⁺作为辅酶,而不是ATP。 热失活:该酶可以通过65℃加热20分钟失活,便于后续实验操作。 大肠杆菌DNA连接酶凭借其高效性和专一性,已成为分子生物学实验中的重要工具,尤其在需要高特异性的连接反应中表现出色。
在细胞的生理过程中,RNase R的一个重要功能是参与细胞内RNA的降解和更新。
Tris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的高浓度缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由900 mM Tris-磷酸、20 mM EDTA和DEPC处理水组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TPE工作液含有90 mM Tris-磷酸和2 mM EDTA,pH值约为8.0。 无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TPE缓冲液用DEPC处理水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TPE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察RNA条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。 避免RNase污染:使用时需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。
上样与电泳:混合均匀后,将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确性和重复性是实验成功的关键。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,提供了一种高效、防污染的qPCR解决方案,确保实验结果的准确性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus)的核心优势在于其整合了UDG技术。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在高温变性步骤中(通常95℃),UDG会迅速失活,不会影响后续的qPCR反应。 产品特点 高效防污染:UDG技术能够有效降解含有尿嘧啶的PCR产物,防止实验室中的残留产物污染,从而减少假阳性结果。
SYBR Green I的诱变性明显低于EB,但仍需谨慎操作,避免直接接触皮肤。
在免疫系统中,B细胞激活因子(BAFF,B Cell Activating Factor)是一种重要的细胞因子,对于B细胞的发育、存活和功能发挥着关键作用。BAFF在维持免疫系统平衡和调节免疫反应中扮演着不可或缺的角色。 BAFF的特性 BAFF,也称为TNFSF13B,是一种属于肿瘤坏死因子(TNF)超家族的细胞因子。它主要由树突状细胞、巨噬细胞和T细胞等免疫细胞分泌。BAFF通过与其受体(如BAFF-R、BCMA和TACI)结合,调节B细胞的增殖、分化和存活。BAFF的表达和活性在免疫系统中受到严格调控,以确保免疫反应的适当性和有效性。 BAFF的功能 BAFF在免疫系统中具有多种重要功能: B细胞发育:BAFF对于B细胞从骨髓到外周淋巴组织的成熟过程至关重要。它支持B细胞的存活和增殖,特别是在早期发育阶段。 免疫调节:BAFF通过调节B细胞的活性,影响抗体的产生。高水平的BAFF可以促进B细胞的活化和抗体分泌,增强免疫反应。 自身免疫疾病:BAFF的异常表达与多种自身免疫疾病相关,如系统性红斑狼疮(SLE)和类风湿性关节炎(RA)。
DNAMarkerIII是一种高效、稳定且易于使用的DNA分子量标准特别适合于琼脂糖凝胶电泳片段分析
GoldenView 吖啶橙核酸染料是一种新型的核酸染料,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于检测DNA和RNA。它是一种安全、高效的替代品,可替代传统的溴化乙锭(EB)染料。 产品特性 GoldenView 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当。在紫外透射光下,双链DNA(dsDNA)呈现绿色荧光,而单链DNA(ssDNA)或RNA则呈现红色荧光。这种特性使其能够清晰地区分DNA和RNA,适用于多种核酸分析实验。 使用方法 使用GoldenView进行琼脂糖凝胶电泳时,操作方法与EB完全相同。通常在100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µl的GoldenView,轻轻摇匀后倒胶,待凝胶完全凝固后进行电泳。电泳完成后,可在紫外灯下直接观察核酸条带。 安全性 GoldenView的主要成分是吖啶橙,虽然具有细胞渗透性,但通过多项致突变性试验验证,结果均为阴性。然而,为确保安全,建议操作时佩戴手套和口罩,避免接触皮肤。
在骨质疏松的治疗中,BMP-2可以增强骨密度,提高骨骼的抗压能力,降低骨折的风险。
白细胞介素 - 16(IL - 16)是一种具有独特功能的细胞因子,在人体免疫系统中发挥着重要的调节作用。它最初被发现具有抑制HIV感染的能力,随后的研究揭示了其在免疫细胞迁移和炎症反应中的关键作用。 IL - 16的生物学功能 IL - 16的主要功能是调节免疫细胞的迁移和活化。它能够吸引多种免疫细胞,特别是CD4+ T细胞、单核细胞和树突状细胞,向炎症部位聚集。这种趋化作用对于启动和维持有效的免疫反应至关重要。此外,IL - 16还能促进T细胞的活化和增殖,增强免疫系统的整体反应能力。 在炎症反应中,IL - 16通过与特定的受体结合,激活下游信号通路,从而调节细胞的炎症反应。它在多种慢性炎症性疾病中,如哮喘、类风湿性关节炎和炎症性肠病中,表现出异常的表达水平,提示其可能在这些疾病的发生和发展中发挥重要作用。 重组人IL - 16的应用 重组人IL - 16是通过基因工程技术生产的,具有与天然IL - 16相似的生物活性。它在研究中被广泛用于探索IL - 16在免疫反应中的具体作用机制
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