SYBR Green qPCR Mix (2×) 以其高灵敏度、特异性、操作简便性和广泛的应用范围
DNA Marker II是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线状双链DNA片段组成,条带大小分别为100 bp、300 bp、500 bp、700 bp、900 bp和1200 bp。其中,700 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳,不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间15-20分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
在使用前,需将 25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液稀释至所需浓度(如 6× 或 5×)。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。此外,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)通过整合低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。
在琼脂糖凝胶电泳中DL2000DNAMarker可作为分子量标准帮助研究人员快速判断DNA片段的长度
Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。
聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔中。
等温扩增变色检测试剂盒是一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的核酸检测工具,能够通过颜色变化直观地检测样品中是否存在目标DNA。该技术利用特异性引物和链置换DNA聚合酶(如Bst DNA Polymerase),在恒定温度下快速扩增DNA,无需复杂的温度循环。工作原理LAMP技术通过针对目标基因的不同区域设计4-6条特异性引物,利用链置换DNA聚合酶(如Bst DNA Polymerase)启动DNA合成,形成哑铃状互补链,并通过连续链置换进入循环扩增阶段。扩增产物的积累会导致反应体系的颜色变化,从而实现可视化检测。产品特点高灵敏度:灵敏度比传统PCR方法高2-5个数量级,检测下限可达20-200 copies/μL。快速检测:仅需1小时即可完成反应,适合快速检测。可视化结果:无需电泳,通过颜色变化(如紫罗兰或蓝紫色变为天蓝色或深天蓝色)即可判断结果。防污染设计:采用dU掺入和热敏型UDG酶技术,有效防止扩增产物污染。应用场景该试剂盒广泛应用于检测生物样品中的病原体、微生物污染等。例如,碧云天的BeyoColor™等温扩增变色检测试剂盒可用于检测特定病原体的感染。此
dNTP Mix是不可或缺的关键试剂,广泛应用于PCR扩增、cDNA合成、DNA测序、引物延伸反应等
SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。
dNTP Set Solution广泛应用于多种分子生物学实验,如基因扩增、cDNA合成等
pA-Tn5转座酶是一种新型融合酶,由高活性的Tn5转座酶与Protein A融合而成。它兼具Tn5转座酶的高效DNA切割能力和Protein A的抗体结合能力,广泛应用于CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。 工作原理 pA-Tn5转座酶通过Protein A与特异性抗体结合,被引导至目标蛋白所在的染色质区域。在该区域,Tn5转座酶能够高效切割DNA,并在切割位点插入测序接头。随后,通过PCR扩增,生成可用于高通量测序的文库。 应用场景 CUT&Tag技术:用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用,如转录因子结合位点、组蛋白修饰分布等。与传统的ChIP-Seq相比,CUT&Tag具有更高的信噪比、更好的可重复性、更短的实验周期(1天完成从细胞到文库构建),且所需细胞量更少。 高通量测序文库构建:pA-Tn5转座酶能够快速片段化DNA,并直接连接测序接头,简化了文库构建的步骤。 单细胞测序:可用于单细胞基因组学研究,通过切割和标记单细胞中的DNA,实现高通量测序。
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