对肠道病毒RNA进行4倍稀释系列检测,结果显示One Step RT-qPCR能够以更高的灵敏度检测
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。SYBR Green qPCR Mix (2×)作为一种专为qPCR设计的预混液,凭借其高效、便捷和高灵敏度的特点,成为了许多实验室的首选试剂。 SYBR Green qPCR Mix的核心优势 SYBR Green qPCR Mix (2×)是一种预配制的高浓度反应体系,专为qPCR实验设计。它含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green荧光染料以及热启动Taq DNA聚合酶。SYBR Green是一种能够特异性结合双链DNA的小分子荧光染料,在qPCR过程中,随着DNA扩增产物的增加,SYBR Green发出的荧光信号也随之增强。通过实时监测荧光信号的变化,可以实现对目标基因的定量分析。 高灵敏度与特异性 SYBR Green qPCR Mix (2×)具有极高的灵敏度,能够检测到低丰度的基因表达。其优化的反应体系确保了高效的DNA扩增,即使在复杂的样本中也能获得准确的定量结果。
Hot-Start Taq DNA Polymerase是一种经过优化的热启动DNA聚合酶
在分子生物学实验中,DNA合成是许多技术的核心,而dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)作为一种特殊的试剂,为DNA合成提供了更多可能性。这种混合液结合了四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脱氧尿苷三磷酸(dUTP),为PCR反应和其他DNA合成实验提供了多功能的支持。 dNTP/dUTP Mixture的独特优势 dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)是一种精心设计的混合液,其中每种dNTP的浓度为2.5 mM,而dUTP的浓度为5 mM。这种独特的配方使其在多种实验中表现出色: PCR反应中的应用:在传统的PCR反应中,dNTPs是DNA合成的基本原料。然而,dUTP的加入为PCR反应提供了额外的功能。例如,某些PCR反应需要引入dUTP来标记DNA,或者在后续实验中利用尿嘧啶糖基化酶(UNG)去除dU,从而实现PCR产物的特异性降解。这种混合液能够满足这些特殊需求,同时保持反应的高效性和特异性。
DNA Marker VII用于验证质粒酶切后的片段大小,确保酶切反应的完整性,快速估算DNA片段
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR Probe Kit作为一种一体化的一步法探针法qPCR试剂盒,为研究人员提供了一个高效、便捷且高特异性的实验解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR Probe Kit采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶:该试剂盒含有高效的逆转录酶,能够在短时间内将RNA转录为cDNA,确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系:试剂盒中的反应体系经过优化,包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、探针法qPCR所需的荧光染料以及其他必要的成分。
适用于多种实验条件,包括不同的琼脂糖浓度和电泳电压(4-10 V/cm),能够根据实验需求灵活调整
在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。特别是来自鳕鱼(Cod)的热敏感型UDG,以其独特的热失活特性和高效性,成为了分子生物学实验中的重要工具。 热敏感型UDG的独特特性 Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) (1U/μl)是一种从鳕鱼中提取并经过工程改造的UDG。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。
Fast Pfu酶的扩增速度是普通Pfu酶的数倍,72℃下30秒即可延伸1kb以上大大缩短了反应时间
在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和便捷性是科研人员追求的目标。Pfu Master Mix (2×) (With Dye)凭借其高保真性和预混染料的特性,成为了实现这一目标的理想选择。 Pfu Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。它以Pfu DNA聚合酶为核心,这种酶源自耐热菌Pyrococcus furiosus,具有强大的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增的准确性。与传统Taq酶相比,Pfu酶的保真度更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 与无染料版本不同,Pfu Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料,这使得实验人员在进行PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。这种预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。
DL2000 Plus在正常使用条件下,可在室温下稳定存放,不会出现条带降解或弥散现象
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,某些qPCR仪器(如ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了高效的探针法qPCR反应体系和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。某些qPCR仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)中的ROX浓度经过精确调整,适用于这些需要低浓度ROX的仪器,同时避免了高浓度ROX可能带来的背景荧光干扰。 产品特点 优化的反应体系:Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。
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