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M-CSF, Human-IL-1β, Human-固城郡海杆状菌

通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。

核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究。其截短体则是通过基因工程改造,删除部分氨基酸序列而获得的变体,通常用于特定的研究目的,如提高酶的稳定性或特异性。 功能与特性 N-糖基化酶活性:识别并切除双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生脱嘌呤(AP)位点。 AP-裂解酶活性:在AP位点的3'和5'端切割磷酸二酯键,产生具有3'和5'磷酸的碱基缺口。 高纯度与稳定性:核酸内切酶VIII截短体通过重组表达获得,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶和RNase残留。 热失活:75℃孵育10分钟可使酶失活。 应用场景 DNA损伤修复研究:用于模拟和修复DNA损伤,特别是在氧化损伤研究中。 单细胞凝胶电泳(彗星试验):评估细胞内和体外的氧化DNA损伤。 NGS建库:在二代测序中,特异性切除含AP位点的模板链,实现双端测序。 酶法合成DNA:释放DNA链,用于合成特定的DNA结构。

耐热核糖核酸酶H能够在高温下高效地完成这一任务,避免了RNA模板在高温条件下的降解问题。

UTP(尿苷三磷酸)是一种重要的核苷酸,广泛应用于分子生物学和生物化学实验中。100 mM UTP溶液(无核酸酶)是一种高纯度、无污染的试剂,适用于多种实验需求。 产品特点 高纯度:纯度≥99%,经过严格测试,确保无DNase、RNase、磷酸酶和蛋白酶污染。 无核酸酶污染:使用无核酸酶水配制,确保RNA和DNA的完整性。 稳定性高:在-20℃条件下可稳定保存长达2年,避免反复冻融。 用途广泛:适用于体外转录、RNA合成与扩增、siRNA合成等多种实验。 应用场景 体外转录:用于SP6、T3和T7 RNA聚合酶的反应,生成高质量的RNA。 RNA合成与扩增:提供能量支持,确保反应顺利进行。 siRNA合成:用于合成小干扰RNA,用于基因沉默。 使用注意事项 避免反复冻融:反复冻融会降低UTP的效率。 低温操作:使用时需在冰上操作,并在使用后立即放回-20℃保存。 防止污染:实验过程中需戴一次性手套,避免RNase污染。 100 mM UTP溶液(无核酸酶)凭借其高纯度、无污染和稳定性,已成为分子生物学实验中的重要试剂,特别适合需要高纯度和高效率的实验。

它具有与 EB 相当的灵敏度,能够检测到低浓度的核酸分子,同时避免了 EB 的高毒性和潜在致癌性。

碱性凝胶加样缓冲液(6×)是一种6倍浓缩的DNA上样缓冲液,专为碱性琼脂糖凝胶电泳设计。它以溴酚蓝和二甲苯青FF为指示剂,稀释至1×后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于电泳指示。产品特性主要成分:溴甲酚绿、二甲苯青FF、Ficoll 400、NaOH和EDTA。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。使用方法稀释:将6×碱性凝胶加样缓冲液与DNA样品按1:5的比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。 避免污染:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。开封后尽快使用:试剂开封后应尽快使用,以防影响后续实验效果。碱性凝胶加样缓冲液(6×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为碱性琼脂糖凝胶电泳实验中的理想选择。

该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确的荧光信号检测是实验成功的关键。50× ROX Reference Dye作为一种常用的被动参考染料,为qPCR实验提供了重要的校准功能,确保了荧光信号的准确性和稳定性。 ROX Reference Dye的作用机制 ROX染料是一种被动参考荧光染料,其主要作用是校正qPCR反应中的非特异性荧光背景和孔间荧光信号的差异。在qPCR实验中,荧光信号的强度可能会受到多种因素的影响,如仪器的荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异等。ROX染料通过提供一个稳定的荧光背景,帮助校正这些非特异性信号,从而提高定量结果的准确性和重复性。 50× ROX Reference Dye的应用 荧光定量PCR(qPCR):在qPCR实验中,ROX染料通常以一定比例添加到反应体系中。它不会参与PCR反应,但会提供一个稳定的荧光背景,用于校正仪器检测到的荧光信号。通过校正,可以更准确地反映目标基因的扩增情况,从而提高定量结果的可靠性。 多重qPCR:在多重qPCR实验中,ROX染料的作用尤为重要。

3'-羟基攻击5'-磷酸末端,形成新的磷酸二酯键,从而完成DNA片段的连接。

等温扩增变色检测试剂盒是一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的核酸检测工具,能够通过颜色变化直观地检测样品中是否存在目标DNA。该技术利用特异性引物和链置换DNA聚合酶(如Bst DNA Polymerase),在恒定温度下快速扩增DNA,无需复杂的温度循环。工作原理LAMP技术通过针对目标基因的不同区域设计4-6条特异性引物,利用链置换DNA聚合酶(如Bst DNA Polymerase)启动DNA合成,形成哑铃状互补链,并通过连续链置换进入循环扩增阶段。扩增产物的积累会导致反应体系的颜色变化,从而实现可视化检测。产品特点高灵敏度:灵敏度比传统PCR方法高2-5个数量级,检测下限可达20-200 copies/μL。快速检测:仅需1小时即可完成反应,适合快速检测。可视化结果:无需电泳,通过颜色变化(如紫罗兰或蓝紫色变为天蓝色或深天蓝色)即可判断结果。防污染设计:采用dU掺入和热敏型UDG酶技术,有效防止扩增产物污染。应用场景该试剂盒广泛应用于检测生物样品中的病原体、微生物污染等。例如,碧云天的BeyoColor™等温扩增变色检测试剂盒可用于检测特定病原体的感染。此

对于小于500 bp的DNA片段,检测信号可能较弱,建议使用其他染料如SYBR Green I。

在分子生物学实验中,核酸电泳是检测核酸片段大小和纯度的关键技术之一。3×甲酰胺凝胶上样缓冲液作为一种高效的辅助试剂,为核酸电泳提供了重要的支持。组成成分3×甲酰胺凝胶上样缓冲液的主要成分包括:甲酰胺(Formamide):高浓度的甲酰胺能够有效变性核酸,使其保持单链状态,避免核酸在电泳过程中形成二级结构,从而实现更准确的分子量测定。二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚(Bromophenol Blue):这两种染料作为示踪剂,可帮助观察电泳的进程。二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。EDTA(乙二胺四乙酸):螯合二价金属离子,防止核酸被核酸酶降解,同时维持电泳过程中的缓冲环境。使用方法样品混合:将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液。变性处理:混合后的样品在70℃加热5-10分钟,使核酸充分变性。加热后立即置于冰上冷却,以防止核酸重新折叠。电泳上样:将处理后的样品加入凝胶的加样孔中,进行电泳。

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