Cre重组酶通过与LoxP位点的反向重复序列结合形成二聚体,进而形成四聚体复合物。
电泳级橙黄G溶液(1%)是一种专为核酸电泳设计的上样液和生物染色剂母液。它主要由1%的甲基橙和去离子水组成,具有良好的稳定性和实用性。产品特性成分:1%甲基橙、去离子水。用途:主要用于核酸电泳的上样液和生物染色。泳动率:在0.5-1.4%的琼脂糖凝胶中,其泳动率相当于50 bp的双链DNA。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。使用方法电泳上样液:将橙黄G溶液与核酸样品混合后直接用于电泳,橙黄G作为示踪剂,可帮助观察样品的迁移情况。生物染色:可用于生物样品的染色,具体使用方法需根据实验需求调整。注意事项毒性:橙黄G溶液有轻微毒性,操作时需谨慎,避免接触皮肤和吸入。保存:建议在室温下避光保存,以延长产品有效期。用途限制:仅供科研使用,不得用于临床诊断。电泳级橙黄G溶液(1%)凭借其高效、稳定的特性,成为核酸电泳实验中的重要工具,广泛应用于分子生物学研究中。
它主要作用于具有黏性末端的DNA片段,但连接平末端的效率较低。
T4 DNA连接酶是一种在分子生物学中不可或缺的工具酶,广泛应用于基因工程和DNA操作中。它最初从T4噬菌体感染的大肠杆菌中分离出来,能够催化双链DNA、RNA或DNA/RNA杂合链中相邻核苷酸的磷酸二酯键形成。 工作原理 T4 DNA连接酶的作用机制包括三个关键步骤: 酶-AMP复合物形成:T4 DNA连接酶首先与ATP结合,将ATP的腺苷酸部分转移到酶的赖氨酸残基上,形成酶-AMP中间体。 DNA末端腺苷化:酶-AMP复合物识别DNA末端的5'-磷酸和3'-羟基,将AMP转移到DNA的5'-磷酸末端。 磷酸二酯键形成:3'-羟基攻击5'-磷酸末端,形成新的磷酸二酯键,从而完成DNA片段的连接。 应用 T4 DNA连接酶在分子克隆中具有多种应用: 黏性末端连接:通过限制性内切酶产生的黏性末端,T4 DNA连接酶可以高效地将DNA片段与载体连接,确保目的片段以正确的方向插入。 平末端连接:虽然连接效率较低,但T4 DNA连接酶也可以用于平末端DNA片段的连接。 RNA修复与连接:它还能修复双链RNA或DNA/RNA杂合链中的单链缺口,用于RNA检测和修复。
Cre/LoxP系统广泛应用于基因编辑领域,包括基因敲除、基因插入、基因翻转和染色体重排等。
10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。
其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。
In-Fusion Cloning Kit 是一种基于同源重组原理的无缝克隆技术,广泛应用于分子生物学研究中。它通过利用In-Fusion酶的特性,能够在DNA片段末端的同源序列之间实现高效、准确的融合,从而将目标片段无缝插入到载体中。 工作原理 In-Fusion技术的核心在于识别DNA片段末端的15个同源碱基。这些同源序列可以通过设计PCR引物来引入。In-Fusion酶从线性DNA链的3'末端切割核苷酸,使两个DNA片段之间形成互补碱基对,通过退火实现片段连接。这种方法无需限制酶切位点,也无需额外的连接步骤,大大简化了克隆流程。 应用与优势 In-Fusion Cloning Kit 可用于单片段或多片段的克隆,克隆效率高达95%以上。它特别适合于需要在载体任意位置插入片段的实验,例如基因编辑、突变导入和基因合成等。此外,该试剂盒还支持多片段克隆,能够在一次反应中将多个片段同时插入到载体中。 市场情况 In-Fusion Cloning Kit 由Takara公司推出,是市场上最受欢迎的无缝克隆试剂盒之一。
Taq PCR Master Mix (2×) Without Dye 是一种即用型的PCR预混液
在分子生物学实验中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的重要挑战。Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)凭借其卓越的长片段扩增能力和预混染料的便捷性,成为了这一领域的理想选择。 Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系,其核心成分为Ultra-Long DNA Polymerase。这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 与无染料版本不同,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料。这种设计使得实验人员在完成PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。
在分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性。
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。
上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!