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苹果木层孔菌-酿酒酵母SHMCCD57155- Sphingobiumamiense(基因组DNA)

胶染法(前染):在制备琼脂糖凝胶时,按 1:10000 的比例加入 4S GelRed 染料

10× DNA/RNA非变性上样缓冲液是一种用于核酸电泳的浓缩缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的非变性凝胶电泳。它主要由甘油、溴酚蓝、二甲苯青等成分组成。这种缓冲液在稀释至1×后,比重较大,能使核酸样品在加样后迅速沉入凝胶孔中,同时其中的染料可以作为电泳指示剂。 优势 适用范围广:适用于双链DNA、单链DNA、RNA引物、小RNA及特定RNA的电泳。 操作简便:使用时只需将核酸样品与缓冲液按9:1的比例混合即可。 安全无污染:无RNase杂质污染,确保RNA样品的完整性。 使用方法 混合样品:将DNA或RNA样品与10×非变性上样缓冲液按9:1的比例混合均匀。 上样:将混合后的样品加入凝胶加样孔中。 电泳:根据实验需求进行电泳,观察染料迁移情况以判断电泳进程。 注意事项 防止核酸降解:操作过程中需使用无RNase的耗材,避免RNA降解。 避免反复冻融:建议分装保存,避免反复冻融影响缓冲液性能。 染色:可在样品或凝胶中预先加入核酸染料,或在电泳结束后对凝胶染色。 10× DNA/RNA非变性上样缓冲液凭借其高效、安全和操作简便的特点,已成为分子生物学实验中核酸电泳的常用工具。

在基因组测序领域,MNase能够快速切割DNA,生成适合测序的片段,提高测序效率。

蛋白A-微球菌核酸酶(Protein A-MNase,简称pA-MNase)是一种融合蛋白,由Protein A和微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)组成。它兼具Protein A的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性,广泛应用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。 特性与优势 高活性:pA-MNase具有高效的核酸内切酶活性,能够在短时间内将DNA降解为单核苷酸和寡核苷酸。 抗体结合能力:Protein A能够特异性结合免疫球蛋白的Fc区,使得pA-MNase可以被引导至目标蛋白所在的染色质区域。 低细胞需求量:适用于低至50个细胞的实验,尤其适合早期胚胎、干细胞和肿瘤等研究领域。 操作简便:实验流程简单,从细胞到二代测序文库的转化仅需1天。 应用场景 pA-MNase主要用于CUT&RUN(Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)技术,这是一种替代传统ChIP-Seq的新技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。

热敏UDG在分子诊断和PCR实验中表现出色,尤其适用于需要严格控制污染的实验环境

甲酰胺加样缓冲液(10×)是一种10倍浓缩的RNA上样缓冲液,广泛应用于RNA电泳实验中。它以溴酚蓝为指示剂,稀释至1×后比重仍然较大,加样后易下沉,且颜色清晰可见,起到电泳指示的作用。产品特性主要成分:去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等。保存条件:2-8℃避光保存,有效期为12个月。用途:专用于RNA电泳,能够提供清晰的指示,便于观察RNA条带。使用方法稀释:将10×甲酰胺加样缓冲液与RNA样品按1:9的比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品直接加入RNA胶内进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。避免RNase污染:操作过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。开封后尽快使用:试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。

dUTP常用于PCR、qPCR、RT-PCR等反应中替代dTTP,可有效去除污染产物,避免假阳性

T3 DNA连接酶是一种ATP依赖型的双链DNA连接酶,来源于T3噬菌体。它能够催化双链DNA中相邻的5'磷酸和3'羟基之间形成磷酸二酯键,广泛应用于分子克隆和基因工程。 工作原理 T3 DNA连接酶通过ATP提供能量,连接双链DNA的黏性末端和平末端。它对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端,尤其在高盐环境下表现出色。在反应体系中加入PEG 6000可以显著提高其对平末端的连接效率。 特点 高盐耐受性:与T4 DNA连接酶相比,T3 DNA连接酶对NaCl的耐受性更高,能够在1.0 M NaCl或KCl的条件下保持95%的活性。 高效连接:对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端。 反应条件:最佳反应温度为25℃,反应缓冲液中通常含有ATP、MgCl₂和PEG 6000。 应用 T3 DNA连接酶广泛应用于以下领域: 分子克隆:用于黏性末端和平末端DNA片段的连接。 定点突变:通过连接特定的DNA片段实现基因突变。 高盐体系连接:适用于需要高离子浓度的实验。 RNA连接:能够连接DNA和RNA杂合双链,用于生成DNA-RNA和RNA-DNA融合链接。

Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)广泛应用于基因克隆、基因表达分析

微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)是一种来源于金黄色葡萄球菌的核酸内切酶,具有广泛的生物技术应用价值。它能够在pH 7-10和Ca²⁺存在的条件下,降解单链、双链、线状和环状等多种形式的DNA和RNA,产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸。 在染色质免疫沉淀实验(ChIP)中,MNase被广泛用于染色质片段化。它能够特异性地消化核小体间连接区域的裸露DNA,而核小体核心颗粒中的DNA因受组蛋白保护而抵抗酶解,从而完整保留与目标蛋白结合的DNA片段。这种方法比传统的超声波片段化更具特异性,且温和,能显著提升实验分辨率。此外,MNase在核小体定位研究中也发挥重要作用,通过MNase-seq技术,研究人员可以绘制多种生物的核小体图谱,揭示核小体组织的特点及其在基因表达调控中的作用。 MNase还被用于降解蛋白制剂中的核酸,以减少核酸污染。在基因组测序领域,MNase能够快速切割DNA,生成适合测序的片段,提高测序效率。此外,MNase在抗菌领域也有应用,例如通过设计特定的寡核苷酸序列,利用MNase的酶解特性,实现抗生素在感染部位的响应性释放。

对肠道病毒RNA进行4倍稀释系列检测,结果显示One Step RT-qPCR能够以更高的灵敏度检测

10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。

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